丙泊酚是一種脂溶性的、用于誘導和維持全身麻醉的短效靜脈麻醉劑。1981年阿斯利康公司用大豆油作為載體，研制開發(fā)出脂肪乳劑的丙泊酚注射液，1986年，至今是丙泊酚載體中應用廣泛的劑型。影響丙泊酚注射液臨床使用安全性的主要指標之一就是粒徑，主要包括平均粒徑和不得檢出的大粒徑[1]。粒徑測定有2種技術，第1種為動態(tài)光散射技術（DLS），第2種為基于米氏散射原理的經典光散射技術。根據這2種測定技術，市面有2種粒度測定儀，以美國PSS公司的動態(tài)激光粒度測定儀和英國馬爾文公司、貝克曼庫爾特的激光散射粒度測定儀為代表。由于原理不同，這2種粒度測定儀測定結果存在差異。

在國內丙泊酚注射液的生產企業(yè)中，部分企業(yè)質量標準中采用動態(tài)光散射法，較嚴格的限度為：平均粒徑應為0.18～0.27μm，90％累計粒徑不得過0.4μm，大于1μm的乳粒數不得過2％，并不得檢出大于3μm的乳粒；另一部分企業(yè)照2010年版《中國藥典》“粒度和粒度分布測定法”測定，限度各不相同，主要檢查小于0.4～0.5μm與大于1μm、3μm或5μm的粒子數。本研究小組承擔企業(yè)標準的統(tǒng)一工作，在此對本研究內容進行總結。

 2010年版《中國藥典》（二部）附錄ⅨE“粒度和粒度分布測定法”即文獻[2]收載的是基于米氏散射原理的光散射法，未收載動態(tài)光散射法。所以本研究按《中國藥典》的方法進行丙泊酚注射液乳粒粒徑的測定，并根據《中國藥典》的要求擬定限度。

 由于激光散射粒度測定儀光學參數的設置與供試品的粒度分布有關，粒徑小于10μm的微粒（丙泊酚注射液大部分粒子的粒徑在0.4μm以下）對系統(tǒng)折光率和吸光度的影響較大，必須對光學參數進行優(yōu)化[3]。目前馬爾文激光散射粒度測定儀的使用面較廣，由于每個企業(yè)設置的儀器參數不一，測定結果不同，導致產品質量無可比性。現以丙泊酚注射液為模型藥物，考察儀器參數的設置情況，以達到規(guī)范操作的目的，使各企業(yè)產品質量具有可比性。

1材料

1.1儀器

 MastersizerMS2000激光散射粒度測定儀（英國馬爾文儀器有限公司）；Nicomp380型動態(tài)激光粒度測定儀（美國PSS公司）。

1.2藥品與試劑

 丙泊酚注射液（來自德國貝朗制藥有限公司、華瑞制藥有限公司、四川國瑞藥業(yè)有限責任公司、廣東嘉博制藥有限公司、西安力邦制藥有限公司、浙江九旭制藥有限公司共6個廠家13個批號產品，主要規(guī)格10ml∶100mg、20ml∶200mg、50 ml ∶ 500 mg 3種）；水為超純水。

2 方法與結果
2.1 Mastersizer MS2000儀器參數的考察
2.1.1 遮光度的選擇。6個生產廠家各自測定時所設定的遮光度值為5%～20%。本研究考察當吸收率和折射率參數相同的情況下，5%～20%的遮光度值對乳粒測定結果產生何種影響，5%～20%的任何值是否都是適宜的。
方法∶將馬爾文公司的粒度測定儀的吸收率設為0.001，折射率設為1.52，通過在稀釋液（純水）中滴加丙泊酚注射液，調節(jié)遮光度分別為4.99%、10.04%、15.11%和20.02%時，乳粒粒徑測定結果見表1。 

表1結果為∶隨遮光度增加，平均粒徑依次減小，殘差依次增加。殘差是儀器自動對實際測定的平均粒徑與理論值的擬合度進行的評價，殘差值越大說明擬合越差。乳粒測定項的設置目的是控制平均粒徑過大，是評價工藝是否優(yōu)良的一個手段。表1中遮光度為15.11%和20.02%時測得的平均粒徑偏?。ɡ碚撝?.2～0.3 μm），不利于對粒徑的控制。
另，在馬爾文公司的粒度測定儀的工作指南中關于遮光度的選擇指南建議∶干法測定時將遮光度設為約5%，測定粒徑小于3～4 μm的樣品時將遮光度設為約10%，測定大于50 μm的樣品時將遮光度設為約15%。而丙泊酚注射液中大部分乳粒的粒徑均在0.4 μm 以下。
根據試驗考察結果，結合馬爾文公司的粒度測定儀的工作指南關于遮光度的選擇指南中的建議，當遮光度設置為5%～10%的任意值，乳粒粒徑測定結果無顯著差異;而遮光度值大于15%時測得的平均粒徑偏小，不利于對粒徑的控制。因此建立的方法中遮光度可選擇范圍設為5%～10%。

2.1.2 吸收率的選擇。馬爾文公司的粒度測定儀吸收率的設置為1×10~"，即0、0.1、0.01、0.001……。6個生產廠家各自測定時所設定的吸收率值有0、0.001和 0.01。本研究考察當在遮光度和折射率參數相同的情況下，設置不同的吸收率對乳粒測定結果產生何種影響，是否0～0.1內的任何值都是適宜的。
方法∶將馬爾文公司的粒度測定儀的折射率設為1.52，通過在稀釋液（純水）中滴加丙泊酚注射液，調節(jié)遮光度約為15%，考察吸收率分別為0、0.001、0.01和0.1時，乳粒粒徑測定結果，見表1。即∶吸收率為0、0.001和0.01時，殘差和平均粒徑無差異;吸收率為0.1時，殘差遠遠大于5%，說明測得的平均粒徑嚴重偏離理論值。因此吸收率可選擇范圍為0～0.01。

2.1.3 折射率的選擇。6個生產廠家各自測定時所設定的折射率值分別為1.47、1.52和1.57。本研究考察當在遮光度和吸收率參數相同的情況下，設置不同的折射率對乳粒粒徑測定結果產生何種影響，是否1.47～1.57內的任何折射率值都是適宜的。
方法∶將馬爾文公司的粒度測定儀的吸收率設為0.001，通過在稀釋液（純水）中滴加丙泊酚注射液，調節(jié)遮光度約為15%，考察折射率為1.47、1.52和1.57時，乳粒粒徑測定結果見表1。即∶在遮光度和吸收率不變的情況下，折射率為1.47和1.52時測得的平均粒徑和殘差無差異;折射率為1.57時，平均粒徑過大（>0.3 μm），明顯偏離真實粒徑。因此折射率可選擇范圍為1.47～1.52。

2.2 樣品測定
根據儀器參數的考察結果及《中國藥典》對乳劑粒度的要求嗎，結合實際情況，擬定標準為∶取本品，照粒度和粒度分布測定法【2010年版《中國藥典》（二部）附錄ⅨE第三法】檢查（若使用馬爾文公司的粒度測定儀，建議參數為吸收率0～0.01，折射率1.47～1.52，遮光度5%～10%），平均粒徑不得過0.4μm，大于1μm的乳粒不得過2%，并不得檢出大于5μm的乳粒。
采用馬爾文公司的粒度測定儀，設定遮光度為5%、折射率為1.47、吸收率為0.01，測定樣品。結果，平均粒徑為0.214～0.335μm，大于1μm和大于5μm的粒子均未檢出。
13批樣品采用經典光散射法測定的粒徑結果見表2。

2.3動態(tài)光散射法與經典光散射法測定結果比較

前文已述，動態(tài)光散射法與經典光散射法對乳粒限度的規(guī)定主要差異在于對"平均粒徑"及"90%累計粒徑不得過0.4 μm"的描述。因此用動態(tài)光散射法（美國PSS公司的動態(tài)激光粒度測定儀）及經典光散射法（英國馬爾文公司的激光粒度測定儀）分別測定各企業(yè)樣品，對這2項結果進行比較。結果顯示動態(tài)光散射法測得的平均粒徑普遍小于經典光散射法測得的結果，測得的小于0.4 μm粒子的百分比普遍大于經典光散射法測得的結果，詳見表3。

 3 討論
（1）《美國藥典》35版"附錄<729>項收載了粒徑測定的2 種光散射技術，即DLS和基于米氏散射原理的經典光散射技術，并說明這2種技術都可以使用，能獲得可接受的結果。筆者經過對這2種技術測定結果的比較，發(fā)現測得的平均粒徑及小于0.4 μm的粒子的百分數有較大差異。因此，采用不同的測定原理，可能要設置不同的限度。因此，統(tǒng)一藥品標準，明確乳粒測定的方法、統(tǒng)一限度，才能使各生產企業(yè)的產品具有可比性。
（2）目前，即使同樣使用經典光散射技術的馬爾文公司的激光粒度測定儀，由于各企業(yè)設置的儀器參數不同，可致測定結果不同，導致產品質量無可比性。為了甄別哪些參數的差異會對結果產生影響，哪些參數的差異不會對結果造成影響，或者多大的差異才會影響結果，本次研究對3個主要的儀器參數進行了考察。終確定了儀器參數的范圍為∶遮光度5%～10%、折射率1.47～1.52、吸收率0～0.01。在此范圍內的參數設置，對測定結果無影響。
（3）本研究以丙泊酚注射液為示范，對乳粒粒徑測定的方法及儀器參數的設置進行了初步探討，為今后研究類似品種如脂肪乳注射液及中長鏈脂肪乳注射液等的乳粒粒徑測定提供了研究方向及思路。參考文獻
【1】 彭婭，賈飛，程剛.丙泊酚及其制劑的研究進展【J】.中國藥
劑學雜志，2012，10（1）∶17.
【2】 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典∶二部【S】.2010年
版.北京∶中國醫(yī)藥科技出版社，2010∶2、附錄74.
【3】 楊道媛，馬成良，孫宏魏，等.馬爾文激光粒度分析儀粒度
檢測方法及其優(yōu)化研究【J】.中國粉體技術，2002，8（5）∶27.
[4] The United States Pharmacopoeia Convention.USP35-NF
30[S]. Baltimore:United Book Press,Inc.,2011:1310.
（收稿日期∶2013-01-23 修回日期∶2013-03-26）